Alzet滲透泵的基本操作指南
一、Alzet滲透泵型號選擇
Alzet滲透泵提供了100ul、200ul和2ml三種不同的藥物容量規格,持續時間從3天到6周不等。實驗時應根據具體需求選擇合適的型號。其中,100ul和200ul的適合成年小鼠使用,而2ml的由于容積較大,更適合大鼠或其他體型較大的動物。
二、Alzet滲透泵濃度計算
藥物濃度的調配需根據每日用藥量和緩釋泵的輸送速率兩項參數來計算,每日用藥量可通過查閱專業文獻獲取。此外,每支緩釋泵的輸送速率信息會附在包裝盒上,應根據包裝上的速率進行配藥。
濃度計算舉例:
Eg:2001滲透泵,給藥:抗利尿激素(ADH),
1.查閱文獻發現,大鼠正常的ADH分泌量為30ng/天/只,或1.25ng/小時/只。然后,計算出完成1.25ng/小時所需輸注量所需的ADH濃度:
ko=Q•Cd
其中ko(µg/hr)是質量輸送速率,Cd(µg/µl)表示藥物溶液濃度,Q(µl/hr)表示泵的泵送速率。
2.2001型泵的(標稱)泵送速率為1µl/hr(Q),因此所需濃度(Cd)為:
Cd=1.25 ng/hr/1µl/hr=1.25 ng/µl
=1.25 x 10-3µg/µl
3.2001型泵儲液體積(標稱)為200µl。為了達到所需的1.25 x 10-3µg/µl濃度,應在200µl中溶解的ADH量為:
m=c•v
(1.25 x 10-3µg/µl)x 200µl=0.25µg
綜上,為了模擬大鼠正常的ADH分泌量30 ng/天/只(或1.25 ng/小時/只),必須在溶液中配制濃度為1.25 x 10-3µg/µl的ADH溶液。應配制過量溶液,以保證泵填充期間的安全裕度。
注意事項:
1、不能根據Alzet滲透泵自身體積來計算配藥濃度,Alzet滲透泵實際載藥體積會稍大于宣稱體積;
2、泵體埋入動物體內后應在釋放周期結束時取出,不能一直留在動物體內。
三、Alzet滲透泵藥液灌充
1、將Alzet滲透泵垂直握在手中,從頂部的孔處插入充液針,直至針尖輕輕接觸到緩慢釋放泵底部,然后略微向上提起充液針約1mm。
2、輕柔地推動注射器,將藥液注入緩慢釋放泵(緩慢釋放泵應始終保持垂直)。當在緩慢釋放泵的孔處看到藥液溢出時,請停止注射,輕輕拔出充液針。
3、將流量調節器完q插入泵體,完成注射,隨后進行培育或植入手術。
4、若泵體內出現氣泡,可將流量調節器拔出并重新進行注射。
注意事項:
1、泵內藥物液體需充盈,泵內不應有空氣存在,否則可能導致泵送速度不穩定。
2、灌輸速度宜適中,以免產生氣泡,避免采用容積過大的注射器進行填充。
四、Alzet滲透泵泵體孵育
在Alzet滲透泵啟動階段,可能會出現泵送速率不穩定的情況。為了調節泵送速率,建議在植入前進行預處理。
1、準備50ml離心管,倒入適量的0.9%生理鹽水。
2、將已灌裝藥液的Alzet滲透泵放入離心管中,然后將離心管放入37℃恒溫箱中進行一定時間的培養(具體時間根據不同型號的Alzet滲透泵而異)。
注意:在培養過程中,確保生理鹽水完q覆蓋泵體。
五、Alzet滲透泵植入手術
Alzet滲透泵可在背部皮下或腹腔植入進行全身性給藥;此外也可連接導管將藥物引導到特定部位進行給藥。
六、Alzet滲透泵皮下植入
1、使動物陷入麻醉狀態,令其躺臥。
2、在肩胛骨之間的皮層上開啟一個裂口。
3、利用止血夾分離皮下結締組織,形成一處間隙。
4、將漸進泵植入其中,確保流量調節器不朝向切口。
5、利用傷口鉗或縫合線縫合皮層切口。
七、Alzet滲透泵腹腔植入
1、麻醉動物,使動物處于仰臥姿態。
2、在動物的胸廓下腹中線的皮膚上用刀劃開口。
3、鑷子挑起腹肌,避免傷及內臟,然后用剪刀向下剪開腹肌。
4、將緩釋泵植入切口,流量調節器不能朝向切口。
5、用縫線縫合肌肉切口,皮膚切口可以使用傷口夾或縫線縫合。
更多有關Alzet滲透泵的介紹,請聯系Alzet滲透泵代理——北京百奧創新科技有限公司!