jetMESSENGR®是一種高效溫和的mRNA轉(zhuǎn)染試劑。與DNA轉(zhuǎn)染相比,mRNA轉(zhuǎn)染具有許多優(yōu)點(diǎn):
★ 沒有基因組整合的風(fēng)險(xiǎn),因此轉(zhuǎn)染細(xì)胞沒有基因組修飾;
★ 無(wú)啟動(dòng)子調(diào)控問題;
★ 無(wú)需到達(dá)細(xì)胞核進(jìn)行有效表達(dá);
★ 更溫和的過(guò)程;
Polyplus轉(zhuǎn)染試劑jetMESSENGER的作用有哪些呢?
一、mRNA 轉(zhuǎn)染
jetMESSENGER®非常適合通過(guò)mRNA轉(zhuǎn)染在神經(jīng)元、原代細(xì)胞、干細(xì)胞和各種癌癥細(xì)胞系等難以轉(zhuǎn)染的細(xì)胞中表達(dá)基因(圖1和圖2)。
圖1 jetMESSENGER®介導(dǎo)的不同難以轉(zhuǎn)染細(xì)胞的轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染后48小時(shí)通過(guò)熒光顯微鏡分析各種細(xì)胞系。使用jetMESSENGER®/eGFP mRNA(5meC,偽尿苷,Trilink™) 根據(jù)制造商的建議。有關(guān)OVCAR-3、NCCIT、MDA-MB-231和SW1353細(xì)胞系的數(shù)據(jù)由Inserm U1199?BioTICLA?(法國(guó)卡昂)提供。
jetMESSENGER®能夠在原代神經(jīng)元中實(shí)現(xiàn)高轉(zhuǎn)染效率,同時(shí)在幾天內(nèi)保持生理和健康的細(xì)胞形態(tài),允許在神jing病學(xué)應(yīng)用中長(zhǎng)期表達(dá)(圖3)。
三、CRISPR/Cas9應(yīng)用
四、細(xì)胞重編程
用jetMESSENGER®轉(zhuǎn)染的細(xì)胞顯示出高活力和感興趣蛋白質(zhì)的長(zhǎng)期表達(dá),使jetMESSENGER®成為重編程研究的理想轉(zhuǎn)染試劑。現(xiàn)在可以將身體的任何細(xì)胞轉(zhuǎn)化為多能干細(xì)胞。例如,可以使用信使核糖核酸轉(zhuǎn)染jetMESSENGER®將成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化為IP。
圖4 jetMESSENGER®適用于轉(zhuǎn)染BJ細(xì)胞(人成纖維細(xì)胞)中的mRNA。轉(zhuǎn)染后48小時(shí)通過(guò)亮場(chǎng)和熒光顯微鏡分析BJ細(xì)胞。使用jetMESSENGER®/eGFP信使核糖核酸(5meC,偽尿苷,Trilink™) 根據(jù)制造商的建議。
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